在角色行当上，徽剧全面继承了“徽池雅调”的角色行当体制，同时又吸收了昆曲、弋阳腔的分行特点，并受到目连戏的深刻影响。其角色在清乾隆以前分为末、生、小生、外、旦、贴、夫、净、丑九行，徽班艺人称之为“九顶网巾唱闹台”。乾隆以后。徽剧在徽商经济的支持下进入全盛时期，角色行当又有所发展，分为正生、老生、小生、大花、小花、二花、四花、正旦、花旦、作旦、武旦、老旦等行。这时期由于班社演员众多，又在打行里分出一些小行，如红生、武老生、武小生、武二花、武丑等，原有的末行改设在杂行。嘉庆时期，随着徽剧中历史和战争题材剧目的增多，角色行当又进一步细分为老生、老外、副末、小生、武生、武老生、正旦、花旦、作旦、武小旦、三梁旦、大花脸、二花脸、三花脸、四花脸、杂行，共十七行。道光、咸丰以后，北京的徽剧逐渐演变成京剧，南方的徽剧班社也随着徽商经济的衰落而缩小，庞大的班社大部分划分为三、五十人的小戏班，角色行当也随之做了相应归并，逐渐固定为近代的十大行当，即正生、老生（文武）、小生（文武）、大花、二花、三花（丑）、正旦、花旦、老旦、武旦。末行归老生行，外设杂行，专门扮演宫女、院子、中军等龙套角色和老虎、狗形之类及武打，兼管道具箱等杂务。角色行当表面上少了，但对演员的要求更高了。每行演员在掌握本行演技之外，还要兼学其他一行或几行，尽量做到技艺全、戏路宽，唱念做打具佳，文武昆乱不挡。